第228章 100%（六更求月票）(2/2)
检测过程需要两个小时。
五十份极早期胰腺癌血清，五十个隐藏在健康下的种子。
这套体系，是他们之前在1万倍稀释的极端低浓度下拉出来的。
他闭上眼睛。
浓度：15ng/μl。
时间一分一秒地过去。
这一切，终于结出果实。
最关键的一步到来了。
易向晚在操作台边走来走去。
程溪瑶和唐培两个女生眼泪都干出来了。
如果扩增曲线是一条平滑的直线，没有起伏，说明患者在两三年前的血液中，并没有这些特异性irna的异常表达。
a260/230：203。
依然没有明显起伏。
整个提取过程耗时将近两个小时。
陈浩倒吸凉气。
“你别晃了。”顾亦舟烦躁地说。
“老大！！！”
他伸手往下压了压。
极度纯净的数据。
“提取成功。”江河淡淡地说了一句，“按这个标准，把剩下的样本全部提出来，王教授，准备逆转录。”
压下盖子。
机器启动。
每一个孔里，都包含着引物、荧光染料、cdna模板和酶。
所有人都围了过来。
“准备上qpcr机。”江河说。
设定循环程序。
实验室里彻底沸腾。
“我们成功了！”
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江河整理了一下白大褂，语气平静地说道：
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如果曲线能漂亮地拉起来，并且ct值（循环阈值）在有效范围内，则证明模型成立。
江河拿起96孔板，放入qpcr仪的反应槽中。
一条条平滑的对数扩增曲线，拔地而起！
连一向稳重的王晓晴教授，此刻也激动得不知道该说什么。
“异丙醇沉淀，负20度静置二十分钟。”
“老大，你太神了！这系统绝了！”
屏幕上跳出数据：
江河被他们摇晃得几乎坐不稳。
“兄弟们，是时候一起去巴尔的摩玩玩了。”
这直接完成了后续的百分之五十。
大家疯了一样地庆祝，互相拥抱，拍打。
“江医生，你回来啦，我有话想跟你说……”
屏幕上依然是一片空白。
晚上八点。
第三十五个循环。
那就意味着，早筛模型失败。
五十份样本的cdna全部准备就绪。
“怎么还没出线？”陆晓林手心已经出汗了。
往水相里滴入5微升浓度为5g/l的糖原作为共沉淀剂。
屏幕上爆发出密集的扩增曲线！
第三十二个循环。
他不说话，其他人也不敢说话。
“我紧张啊师兄，万一……我是说万一，欧洲那边的血清变质了怎么办？或者我们找的那些标志物其实在极早期根本不释放？”
这意味着，他们在零八年，把癌中之王在血液中揪了出来。
所有人屏息。
输入参数。
“糖原。”
屏幕的坐标轴上，第一条曲线的尾部，出现了一个上扬角度。
易向晚猛地冲上来，从后面抱住江河：“我们成功了！！卧槽！牛逼啊！老大我们真的成功了！”
“洗涤。”
顾亦舟也冲了过来，怒吼道：“牛逼！牛逼！”
王晓晴呼吸也急促起来：“内参曲线平稳，不存在加样误差……出来了，江河，和我们之前建立的300组健康基线相比，50份样本的特征irna全部呈显著高表达！”
江河拿着溶解后的样本，走到nanodrop分光光度计前。
利用特定的茎环引物，将极其微量的irna逆转录成cdna。
今生从盲缝开始，一步步积累资金，招揽团队……
倒掉上清液，管底出现了一个微小的白色沉淀团块。
【irna胰腺癌早筛项目进度：100】
没有人提议吃饭。
“数据封存，整理报告。”
二十分钟后，再次离心。
沈钰的面容在眼前闪过。
“开始运行。”
所有人都围了上来。
江河咬牙。
王晓晴立刻将准备好的糖原递上。
紧接着，第二条、第三条、第五条曲线……
没有任何杂乱的非特异性扩增！
加入75乙醇，温和洗涤，离心，弃液。
“闭嘴。”所有人一起打断了他。
滴入1微升样本，放下检测臂。
江河拉过一把椅子，坐在电脑前。
完成了这一步。
蔡卓群沉声说道：“急什么，极早期的样本，浓度低，ct值肯定靠后。”
实验室里稍微安静了一些，所有人都目光灼灼地盯着他。
第一批五个样本的rna提取完成。
而在另一侧的熔解曲线界面上，更是拉出了漂亮整齐的单峰！
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这项成果，可以将癌症的发现时间，整整提前两到三年！
“收到。”王晓晴立刻接过样本，走向另一边的操作台。
这一次，不会再让你说出那句话，我保证。
前世他查阅了无数文献，在实验室里熬了无数个日夜，一万次失败才换来一次稳定读数的执念。
“卧槽……”
a260/280：195。
“风干，加无酶水溶解。”
第三十三个循环。
陆晓林和蔡卓群对视了一眼。
窗外的天色逐渐暗了下来。
突然。
上扬的角度开始变大。
所有人，接力完成每一个步骤。
经历了跨国运输和反复冻融，他们依然靠这套提取工艺拿到了完美的样本。
任由他们发泄着情绪，嘴角终于扬起一抹笑意。
第一阶段的变性、退火、延伸循环结束。
江河伸出手。
这两个小时，对实验室里的每一个人来说，都如同世纪般漫长。
“拿下！拿下！”
逆转录过程相对自动化。
江河依然坐在椅子上，脑海中的进度条跳动。
第三十个循环。
易向晚直接爆了一句粗口。
易向晚赶忙举手：“抱歉！”
易向晚和顾亦舟将配制好的pcr反应体系小心翼翼地加入96孔板中。
“完美的数据啊！！！”